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吐温辅助水剂法同步制备芝麻油和芝麻蛋白的研究

发布日期:2019-08-30 作者: 点击:

吐温辅助水剂法同步制备芝麻油和芝麻蛋白的研究


娄丽丽,章绍兵
(河南工业大学 粮油食品学院,郑州 450001)


摘要:吐温是一种水溶性表面活性剂,对蛋白乳状液的稳定性有显著影响。将吐温用于水剂法提取芝麻油和芝麻蛋白的研究,期望提高产品提取率。研究发现吐温类表面活性剂对芝麻油提取率都有显著影响,但对芝麻蛋白提取率影响不显著。利用正交实验优化吐温20辅助水剂法提取条件,得到最佳工艺条件为:pH 11,料液比1∶ 6,浸提时间30 min,浸提温度50 ℃,吐温20添加量1%。在最佳工艺条件下芝麻油提取率为(60.97±2.43)%,显著高于单纯水剂法的提取率(45.90±212)%,芝麻蛋白提取率为(63.53±1.79)%。
关键词:水剂法;同步提取;吐温;芝麻油;芝麻蛋白
中图分类号:TS224;TQ936.2    文献标识码:A    文章编号:1003-7969(2018)12-0005-05


Tween-assisted simultaneous aqueous extraction of sesame oil and sesame protein
LOU Lili,ZHANG Shaobing
(College of Food Science and Technology, Henan University of Technology, Zhengzhou 450001, China)


Abstract:Tween was a kind of water-soluble surfactant, and it has a significant influence on the stability of protein emulsion. Therefore, Tween was used in simultaneous aqueous extraction of sesame oil and sesame protein in order to improve extraction rates of the products. The results showed that Tween had significant influence on the extraction rate of sesame oil, but it had no significant influence on extraction rate of sesame protein. The orthogonal experiment was designed to optimize the Tween 20-assisted aqueous extraction conditions and the optimal conditions were obtained as follows: pH 11, solid-liquid ratio 1∶ 6, extraction time 30 min, extraction temperature 50 ℃ and dosage of Tween 20 1%. Under these conditions, the extraction rate of sesame oil was (60.97±2.43)%, which was much higher than that by aqueous extraction ((45.90±2.12)%), and the extraction rate of sesame protein was (63.53±1.79)%.
Key words:aqueous extraction; simultaneous extraction; Tween; sesame oil; sesame protein


  芝麻含有丰富的蛋白质和油脂,是一种优质的油料作物。芝麻除含有大量脂肪、蛋白质等基本营养物质外,还含有芝麻酚、芝麻素、芝麻林素等木脂素类抗氧化活性物质和维生素E,被誉为“全能营养库”,具有极高的药用和保健功能[1-2]。芝麻蛋白中的氨基酸种类几乎包含了所有人体必需氨基酸,其氨基酸组成与 FAO/WHO 推荐的人类蛋白质标准具有很好的一致性,是一种互补性很好的蛋白。此外,芝麻蛋白中的含硫氨基酸比其他植物蛋白丰富,营养价值极高[3-4]。芝麻油的提取方法目前主要有高温压榨法[5]和溶剂浸出法[6]。 压榨法得到的芝麻油虽然能保留其特殊风味,但出油率较低;浸出法出油率较高但毛油成分复杂,需要严格的精炼处理。此外,压榨法和浸出法得到的芝麻粕中蛋白质变性严重,常常被用于动物饲料,导致蛋白资源的严重浪费。水剂法提油工艺研究从20世纪开始于花生[7],之后又应用到其他油料中[8]。水剂法的最大特点是提油过程中同时还可以提取蛋白质。但这种方法在提油过程中会形成大量的乳状液(O/W),严重影响出油率,这也是制约该工艺推广应用的主要“瓶颈”。尽管蛋白酶深度水解可以有效破乳,但同时得到的水解蛋白功能性质有所弱化,限制了油料蛋白的应用范围[9-10]。因此,寻求替代蛋白酶水解的有效破乳方法对于推广水剂法提油工艺有重要意义。
     吐温是一种表面活性剂,与蛋白质在界面膜上同时存在时,能够竞争参与乳化,形成不稳定的乳状液[11]。Zhang 等[12]将吐温20用于水剂法提取花生油中,研究发现在高pH体系中,加入吐温20后提油过程中形成的乳状液很不稳定,离心后一步提取游离油得率高达76.1%,基本与使用蛋白酶的工艺所得油脂得率持平。本文以芝麻为研究对象,通过水剂法同步提取芝麻油和芝麻蛋白,分析影响芝麻油和芝麻蛋白提取率的关键因素,并研究吐温添加对芝麻油和芝麻蛋白提取率的影响,优化提取工艺参数。
1 材料与方法
1.1 实验材料
     白芝麻(蛋白质含量23.97%,粗脂肪含量5978%,水分含量2.6%):市售。吐温20、吐温60和吐温80:化学纯。
     水浴恒温振荡器;万能粉碎机;DT5-4B型低速台式离心机。
1。2 实验方法
1.2.1 水剂法同步制备芝麻油和芝麻蛋白工艺
     取一定量芝麻于粉碎机中分4次粉碎,时间为3.5 min,取20 g粉碎的芝麻于250 mL的离心杯中,将蒸馏水按照一定的料液比加入离心杯中,并搅拌均匀,再用3 mol/L的氢氧化钠调节体系pH,将装有样品的离心杯放入一定温度的水浴振荡器中,以150 r/min的转速进行振荡,振荡结束后将物料转移至离心机中进行离心(4 000 r/min,15 min),用小勺将离心过后上层油液移至50 mL的离心管中,再次离心(4 000 r/min,10 min),用吸管吸出上层清油,称重,并测水相中蛋白质含量,计算芝麻油和芝麻蛋白的提取率。
     芝麻油提取率=清油质量/芝麻中总油质量×100%;芝麻蛋白提取率=水相蛋白质量/芝麻中总蛋白质量×100%。
1.2.2 吐温辅助水剂法同步制备芝麻油和芝麻蛋白
     提前配制一定浓度的吐温表面活性剂水溶液备用。将芝麻粉碎后取20 g样品,加入配制好的吐温溶液混匀,调pH振荡离心。其他操作同1.2.1。
1.2.3 相关指标测定
     芝麻原料和水相中蛋白质含量的测定:凯氏定氮法,参照GB 5009。5—2010;油脂含量的测定:索氏抽提法,参照GB/T 5009。6—2003。
1。2。4 数据统计与分析
     实验结果以两次以上实验的平均值表示,并使用SPSS 13.0软件进行单因素方差分析,P<0.05表示差异显著。
2 结果与讨论
2.1 水剂法提取芝麻油和芝麻蛋白单因素实验
2。1。1 pH对芝麻油和芝麻蛋白提取率的影响
     在料液比 1∶ 5、浸提温度 50 ℃、浸提时间30 min条件下,研究不同pH对芝麻油和芝麻蛋白提取率的影响,结果见图1。

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由图1可知,随着pH的增加,芝麻蛋白的提取率有显著提高。因为pH越大,蛋白质的溶解度也越大。pH由7到8时,芝麻油的提取率有明显提高,但pH超过8之后,芝麻油的提取率几乎不再增加。可能是因为在中性条件(pH 7)下蛋白质的溶解度较低,油和蛋白结合较紧密难以被释放出来,而pH增加到8时,蛋白质溶解度增加有利于油的释放。随着pH的继续增加,蛋白质的溶解度也增加,但其乳化性也在提高,油和蛋白乳化容易形成乳状液,从而限制芝麻油的提取。

2.1.2 料液比对芝麻油和芝麻蛋白提取率的影响

在pH 11、浸提温度50 ℃、浸提时间30 min条件下,研究不同料液比对芝麻油和芝麻蛋白提取率的影响,结果见图2。

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由图2可知,随着料液比的增加,芝麻蛋白提取率逐渐增加后趋于稳定,当料液比为 1∶ 7时,芝麻蛋白提取率达到最大值。可能是因为料液比较低时,水加入量少,原料与水的接触不完全,浆渣的黏度过高,不利于芝麻蛋白的析出[13]。而芝麻油提取率随料液比变化比较复杂,在料液比为1∶ 5时芝麻油提取率最低,料液比为1∶ 3时芝麻蛋白溶解较少,油脂乳化现象较轻,芝麻油提取率较高;而料液比逐渐增大,芝麻蛋白溶解增加,与芝麻油产生乳化现象使芝麻油的提取率降低;当料液比超过1∶ 5后,芝麻蛋白溶解量增加的同时也有利于芝麻油的提取。

2.1.3 浸提时间对芝麻油和芝麻蛋白提取率的影响

在pH 11、料液比1∶ 7、浸提温度50 ℃的条件下,研究不同浸提时间对芝麻油和芝麻蛋白提取率的影响,结果见图3。

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 由图3可知,随着浸提时间的延长,芝麻油提取率先升高后降低,浸提时间30 min时芝麻油提取率最高。可能是15 min时浸提时间较短,芝麻油没有被完全析出,当浸提时间30 min时芝麻油析出完全,提取率较高。而浸提时间超过30 min后,随着浸提时间的延长蛋白与油乳化程度增加,从而使芝麻油提取率降低。在本实验条件下,随着浸提时间的延长,芝麻蛋白提取率几乎没有变化,说明芝麻蛋白的溶出速率较快,可以在短时间内完成提取过程。

2。1。4 浸提温度对芝麻油和芝麻蛋白提取率的影响

  在pH 11、料液比1∶ 7、浸提时间30 min的条件下,研究不同浸提温度对芝麻油和芝麻蛋白提取率的影响,结果见图4。

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  由图4可知,随着浸提温度的升高,芝麻蛋白的提取率并没有明显变化,说明浸提温度对芝麻蛋白的提取没有显著影响。当浸提温度由30 ℃升高到50 ℃时,芝麻油提取率逐渐增加,这可能是因为温度较低时,油脂黏度较大,油不易从细胞中分离;随着温度的升高,油脂黏度降低,易于油的分离。浸提温度在50 ℃之后,芝麻油提取率没有明显变化,可能在50 ℃时油脂黏度已经较低,温度再升高对油脂黏度的影响不是很大,因此芝麻油提取率也没有明显变化。

2.2 吐温辅助水剂法制备芝麻油和芝麻蛋白

由上述研究可知,单纯采用水剂法提取芝麻油和芝麻蛋白,芝麻油和芝麻蛋白提取率较低,为进一步提高芝麻油和芝麻蛋白提取率,尝试采用吐温辅助提取。

2.2.1 吐温种类对芝麻油和芝麻蛋白提取率的影响

 按1.2.2的实验方法,在pH 11、料液比1∶ 7、浸提温度50 ℃、浸提时间30 min、吐温添加量1%的条件下,研究吐温种类对芝麻油和芝麻蛋白提取率的影响,结果见图5。

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由图5可知,吐温20、吐温60和吐温80对芝麻油的提取率都远高于单独水剂法的提取率,但对芝麻蛋白的提取没有作用。Wilde等[14]研究认为当小分子表面活性剂和蛋白质共存时,起初表面活性剂可以吸附到蛋白质比较薄弱的区域,随着越来越多的表面活性剂吸附到这些蛋白质薄弱区域,界面会变得不牢固,由于排水速率和聚合速率的增加,泡沫和乳状液将变得更不稳定。随着表面活性剂的替代进行,表面活性剂富集区域的表面压力比蛋白质富集区域的表面压力要大,当蛋白质的表面压力达到破裂点时,蛋白质层将会坍塌,最后蛋白质的网络结构被破坏并从表面上被替换,乳状液稳定性变差。Zhang等[12]也提出吐温20与花生蛋白共存时,会优先吸附到油水界面上,得到的乳状液不稳定、易破乳。因此,本文在后面实验中选用吐温20进行芝麻油的辅助提取。

2.2.2 吐温20添加量对芝麻油和芝麻蛋白提取率的影响

按1.2.2的实验方法,在pH 11、料液比1∶ 7、浸提温度50 ℃、浸提时间30 min的条件下,研究吐温20不同添加量对芝麻油和芝麻蛋白提取率的影响,结果见图6。

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由图6可知,随着吐温20添加量的增加芝麻蛋白提取率基本不变,而芝麻油提取率先增加后降低,吐温20添加量为1%时芝麻油提取率达到最大。这可能是因为吐温20添加量较低时,吐温对界面蛋白质的替换量较少,蛋白质和油形成的乳状液较稳定,芝麻油提取率较低。当吐温20添加量增加到1%时,吐温20能将界面上的大部分蛋白质替代掉,同时伴随着吸附层的松散和变薄,此时乳状液极不稳定,离心后就能破乳。而当吐温20添加量增加至125%时,较多的吐温20可能会与油发生乳化作用再次形成乳状液,从而影响芝麻油的提取。

2.3 正交实验

由单因素实验可知,浸提温度对芝麻油和芝麻蛋白提取率的影响较小,而pH、料液比、浸提时间、吐温20添加量对芝麻油和芝麻蛋白提取率的影响较为显著,因此固定浸提温度50 ℃,选取影响显著的因素进行四因素三水平的正交实验,正交实验因素水平见表1,以芝麻油和芝麻蛋白的提取率为考察指标,正交实验设计及结果见表2,芝麻油和芝麻蛋白提取率显著性分析分别见表3、表4。
     由表2~表4可知,pH、料液比、浸提时间、吐温20添加量对芝麻油提取率都有显著影响,pH和料液比对芝麻蛋白提取率有显著影响,而浸提时间和吐温20添加量对芝麻蛋白提取率影响不显著。其中pH 是影响芝麻油和芝麻蛋白提取率的最主要因素,各因素对芝麻油和芝麻蛋白提取率的影响分别为A(pH)>D(吐温20添加量)>C(浸提时间)>B(料液比),A (pH)>B(料液比)>C(浸提时间)>D(吐温20添加量)。根据极差分析结果并综合考虑得到各因素的最佳水平组合为 A3B1C2D3,即优化的工艺参数为pH 11、料液比1∶ 6、浸提时间30 min、吐温20添加量1%。在最佳工艺条件下进行二次验证实验,芝麻油提取率为(60。97±243)%,远高于单纯水剂法芝麻油提取率(45。90%±212)%,芝麻蛋白提取率为(63。53±1。79)%,与单纯水剂法提取率无显著差别。

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3 结 论
     在水剂法提油过程中,pH 是影响芝麻油和芝麻蛋白提取率的最主要因素;吐温类表面活性剂对芝麻油提取率都有显著影响,但对芝麻蛋白提取率影响不显著。吐温20辅助水剂法提取芝麻油和芝麻蛋白的最佳工艺条件为pH 11、料液比1∶ 6、浸提时间30 min、浸提温度50 ℃、吐温20添加量1%,在此工艺条件下进行验证实验,芝麻油的提取率为(6097±2.43)%,芝麻蛋白的提取率为(63.53±179)%。吐温20可以显著提高芝麻油提取率。
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